免疫检测技术是一种以抗原抗体特异性识别和结合为原理对样品中特定的目标物进行定性定量测定的分析方法,其在临床医学、现代生命科学、食品科学、生态学等领域发挥着重要作用。下文综述近些年来评价较高的免疫学检测技术以及其研究近况。
免疫荧光技术
免疫荧光技术指使用荧光色素对目标进行标记再开展检测。原理是利用抗体、抗原产生特异性融合,通过荧光显微镜鉴别待测目标。在临床中,免疫荧光技术的应用有两种,即放射免疫与时间分辨免疫分析法,竞争反应是放射免疫分析技术的主要利用原理,该检测方式被广泛认为是发展前景最大的检测技术。时间分辨免疫荧光分析法可以标记酶、同位素,此外由于在检测中,试剂存放时间较长,而所应用的相关材料制作简单,故而有部分学者将其称作免疫技术中的新成果。
免疫层析技术
免疫层析技术是种色谱分析技术,根据抗原、抗体特异性相互吸附原理展开,检测操作简单,可以在短时间内完成。胶体金免疫层析技术是一种把层析分析技术、胶体金标记技术以及免疫检测技术三者相结合的固相免疫检测技术,它也是把抗原、抗体反应与胶体金标记技术相结合的一种技术形式,通过毛细作用把固定在膜表面的抗体、抗原出现泳动,并且使层析条带上待测目标抗体、抗原和样品待测目标产生高亲和性的免疫反应,层析反应时,免疫复合物被集中于层析条检测带位置,之后利用色标记物清晰检测待测目标。
酶联免疫吸附技术
酶联免疫吸附技术是利用酶强催化特点,并结合抗原抗体特异性反应的一种新型技术,可以实现抗体、抗原的检测。酶联免疫吸附技术特点在于高稳定性、过程便利、操作简单以及高特异性等,并且由于成本可控优势,它多用于现场临时检测中,特别是食品微量元素素检测,比如过敏原等。有学者便通过双抗体夹心法检测得到虾中过敏原成分。另外,酶联免疫吸附技术也存在相应的弊端,比如多残留检测中不可应用、抗体制作具有一定困难性、结构化合物可能出现交叉反应,并且检测结果存在假阳性风险。
电化学免疫传感器
电化学免疫传感器是免疫传感器中类型最多、研究最早的检测技术之一,当前已相对成熟。阻抗性免疫传感器有着高度特异性特点,它是利用阻抗谱对传感界面变化的灵敏性来检测待测物质浓度的一种方式。有学者展开过相关研究,把葡萄糖氧化酶以及HRP固定于纳米物质上当做生物催化剂,催化过氧化氢氧化4-氯萘酚,构建了新型检测甲胎蛋白的阻抗型免疫传感器。电位型免疫传感器是通过测定抗原抗体特异性反应过程中电位的变化而进行免疫分析的一种检测方式。但由于检测溶液中离子浓度不确定性及多离子性因素,此方式获取的结果不太稳定。电容型免疫传感器电容型免疫传感器的测量原理较为简单,主要有两点:一是离子被消耗产生的溶液导电性现象。二是出现免疫生化反应现象,表面电荷变化以及物质吸附于双电层结构而言,有着极为醒目的影响。电流型免疫传感器是在电压恒定的情况下测定抗原抗体特异性反应中电流变化的一种免疫检测方式。主要方式为酶标记方式与非酶标记方式两种。
免疫磁珠分离技术
免疫磁珠不但可与活性蛋白产生反应,并且可以被磁力吸引,本质属于一种磁性微球,它的表面覆盖多类型的化学基团,这赋予了它与其他物质产生结合反应的能力。此技术原理为把包被有抗体的磁珠与致病微生物反应结合,进而成为抗原、抗体复合物质,然而因磁力因素,其他磁性微球也会与之形成相吸效果,使得该复合物能够和其他物质分离,达到分离致病微生物的目的。