真菌涂片镜检法
真菌涂片镜检操作简单,是最常用的方法,具有准确性高、结果快速等优点。在检查中,该措施主要是通过荧光染色进行检验,使用1.78mol/L KOH溶液载玻片,溶解细胞,进而帮助有效检出真菌。在检验过程中,通过高倍显微镜观察,对真菌的数量、结构以及形态等进行分析。但这种方法错误率高,容易出现假阳性、假阴性,在一定程度上对检验人员的检验经验要求较高。除此之外,在粪便、尿液、痰液等检验中,真菌涂片镜检技术发挥了显著优势,可有效提高真菌检出率,应用效果非常理想,对改善疾病治疗及预后效果有积极意义。
血清学检验法
1.抗体检验
对于健康个体的检测,抗体检测应用较为广泛。如果患者存在免疫抑制,容易出现抗体滴度低的状况,进而对检验结果产生消极影响,降低检验准确性。在临床实践中,该措施主要应用于慢性坏死肺曲霉菌病、球孢子菌病、变应性支气管肺曲霉菌病等。但部分侵袭性肺曲霉菌、隐球菌病、念珠菌病患者免疫功能受损,该检验意义不显著。
2.抗原与真菌细胞壁成分检测
该检测包括曲霉半乳甘露聚糖抗原、隐球菌抗原、念珠菌抗原等,对于免疫功能低下的真菌感染这的检测价值显著。念珠菌抗原检测是通过检测念珠菌细胞壁上的甘露聚糖蛋白、念珠菌烯醇化酶、甘露聚糖进行的,前者应用较为广泛,具有较高特异性。但需要注意的是,甘露聚糖抗体阳性出现较晚,甘露聚糖抗原阳性较早。
外科疾病患者更容易出现甘露聚糖抗体阳性;血液病、重症患者更容易出现甘露聚糖抗原阳性。隐球菌抗原的检测方法有三种,即胶体金免疫层析法(LFA)、乳酸测定法(LA)。LFA结果更客观,且操作方便,反应时间短,更受到检验人员的青睐。该措施的实施能通过半定量和定性方法,对检验准确性具有积极意义。但由于营养方式、其他抗菌素、抗菌药物使用等因素,容易出现误诊和漏诊,导致该方法受到一定限制。因此,为保证疾病的诊断效果,临床实践将结合其他方法进行半乳甘露聚糖曲霉抗原检测。
分子生物学检验法
分子生物学技术在传染病诊断中优势显著,是一种新的检测方法。该措施与血清学、真菌显微镜等方法相比,其检测灵敏度较高,检测速度相对较快,耐药基因检测效果更好。分子生物学技术真菌检测方法主要是通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)或巢式PCR进行,对真菌的分类和系统发育检出具有积极意义,其效果显著优于传统分类学,结果更接近客观现实。随着技术的不断发展,该方法衍生出PCR-电喷雾电离质谱法、PCR-核磁共振分析、PCR测序、PCR磁共振测定、T2Dx、T2Biosystems、PCR电喷雾电离质谱、PCR-测序等。
质谱检验
在微生物鉴定中,质谱技术能有效检测生物大分子,应用价值高。质谱技术操作方法简单,可以快速鉴定酵母菌、丝状真菌、细菌,准确性高,检测时间短,应用广泛,对疾病诊断具有积极意义。近年来,随着质谱技术的不断发展和提取方法、蛋白质培养日益标准化,其在真菌鉴定中的准确性也随之增加。
综上所述,真菌检验可以为疾病治疗提供指导,在检验技术发展的背景下,真菌检验技术特异度、灵敏度、准确率显著提升,临床可结合患者实际状况,选择最佳检验方法,提升检验准确率。