目前，对乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的检测均采用免疫学方法，最常用的是酶联免疫吸附试验（ELISA）。HBsAg酶联免疫法采用双抗体夹心法，该方法具有较高的灵敏度和特异性，但操作好、较为烦琐，耗时较长，只能定性。而且有时可能有检测错误（假阳性或假阴性）的情况，如高度溶血的样本，血液没有完全凝固的血清样本，有微生物污染的样本，使用叠氮钠防腐的样本，血清脂质过高，血液黏度过大等情况；洗板时洗涤液溢出，污染其他孔标本；实验过程孵育时间过长或温度过高；类风湿因子影响；服用某些药物等。此外有极少数不明原因的检测HBsAg假阳性。
