1 临床标本细菌检验的基本程序

在将标本采集后，一般需要正确运输、保存、送检，可采用肉眼观察标本、直接检查、真菌培养、分离培养、血清学检验等不同的方式进行检查。采用标本直接检查的方式，可选用图片染色镜检、抗原检查或核酸检测；分离培养可分别进行需氧培养、厌氧培养以及二氧化碳培养。在进行培养中，针对培养结果进行鉴定试验以及药敏试验，最后得出检验报告。

2 具体检验流程

2.1血液感染

正常人的血液一般情况下是无菌的，患有菌血症的患者一般在其血液中可检测到细菌的存在，包括一过性和持续性在血中存在等情况；败血症是指病原菌在侵入血流之后，在其中中大量繁殖，并产生毒性产物，引起全身中毒的症状，一般此类患者的血液标本中可明显检测出有毒物质；脓毒血症是指化脓性细菌败血症时，细菌通过血流扩散至全身其他组织和器官，并产生新的化脓性病灶，一般此种情况病情较为严重，可在广泛检出有毒情况。常见的病原菌：（1）革兰阳性菌中的球菌主要包括金黄色葡萄球菌、A型链球菌、B型链球菌、肺炎链球菌、肠球菌、草绿色链球菌；杆菌主要包括产单核李斯特菌、炭疽杆菌、结核分枝杆菌、产气荚膜梭菌；真菌主要包括假丝酵母菌、曲霉菌、隐球菌以及球孢子菌。而革兰阴性菌中的球菌主要包括脑膜炎球菌、卡它布兰汉菌；杆菌主要包括大肠杆菌、伤寒沙门菌、克雷伯菌、沙雷菌、绿脓杆菌、不动杆菌、气单胞菌，流感嗜血杆菌、布鲁菌、嗜肺军团菌类杆菌等。

标本采集的方法为：病人发热初期或高峰期进行采血或在未使用抗生素前进行采集，如果存在怀疑细菌性心内膜炎时，采集血培养不少于三次。一般情况下均为静脉采血，成人采血量大约为5-10毫升，儿童3-5毫升，婴儿1-2毫升。床边直接注入血液培养基，否则用SPS抗凝剂送检不得用EDTA枸橼酸钠抗凝。检查血管内的导管是否存在有细菌污染等情况，可以进行无菌操作，剪下导管5厘米远侧端，置在放置于无菌容器内进行送检。

生物分离培养和鉴定方法为：采用自动血培养分析仪时，选用相应的血培养瓶，例如需氧菌加厌氧或需氧菌加高渗等。当观察到有细菌生长或血培养仪阳性报警时需要及时进行如下检验。（1）图片染色镜检结果及时与临床进行联系；（2）转种血平板、巧克力平板、厌氧血平板或其他特殊培养基等分离培养纯菌再进行鉴定；（3）同时进行药敏实验，及时报告结果，做临床治疗参考。（4）报告方式：如果属于阴性，报告期小于7天内报告无细菌生长；如果疑似为亚急性细菌性心内膜炎、布鲁菌病、厌氧菌血症、真菌血症时，血培养至少需要连续培养至三周，仍无细菌生长者可报告为阴性。如果存在阳性结果，需要进采用三级报告的方式：第1级报告，告知标本已经出现阳性并直接报告细菌涂片的结果，同时做初步药敏试验；第2级是报告初步药敏结果，同时进行正式的鉴定和药敏试验；第3级报告正式的鉴定和药敏试验结果。

临床意义：葡萄球菌菌血症常由疖、痈、脓、肿以及烧伤创面等原发感染灶继发发生，也可能由于呼吸道感染从而引起；G-菌主要侵犯或危及机体免疫力功能低下的患者，耐药菌株不断增加；厌氧菌的菌血症常合并需氧菌感染，临床症状较重并且复杂；L型菌的菌血症主要由于使用抑制细菌细胞壁合成的抗生素后，由缺损细胞壁的细菌感染所致。免疫低下者常出现真菌菌血症。同时近年间院内感染菌血症的发生率不断上升。

2 中枢系统感染。

常见导致中枢系统感染的病原菌主要包括：

标本采集：在进行用药前，采用无菌操作的方法，腰穿采集2~3毫升，置于无菌试管，常温下立即送检。天冷时进行保温，不可用冰箱进行储存，进行病毒检测时，应及时冷藏送检。

检验方法：（1）涂片镜检离心3000rpm15分钟。一般细菌进行革兰染色，分枝杆菌进行抗酸染色，隐球菌进行墨汁染色，病毒颗粒进行电镜检查。

分离培养：5g/ml的葡萄糖真菌，血平板、中国蓝琼脂平板或麦康凯琼脂平板、巧克力平板。结核菌接种罗-琴培养基或米氏7H10培养基。真菌培养接种沙氏培养基。病毒培养常用动物接种、鸡胚接种、细胞培养。

临床意义：细菌性脑膜炎是中枢神经系统感染的常见类型；真菌性脑膜炎最常见于隐球菌、脑膜炎以及其他的真菌性脑膜炎，例如白假丝酵母、球孢子性脑膜炎日益增多，特别是免疫低下和恶性疾病患者更容易发生；流行性乙脑，可获得持久性免疫力，再次发病者极为少见，肠道病毒对中枢系统神经的危害性，逐渐引起人们的广泛关注和重视。