HPV检查方法多样,其中应用聚合酶链式反应(PCR)技术检测HPV DNA是实验室最常用于检测HPV的方法,这也是宫颈癌前病变筛查和治疗指南推荐作为宫颈癌的首选筛查方法。那么你知道采集的标本送到我们检验科后,它们经历了什么?检验科是怎么发现阴阳性的?感染HPV是不是就得了宫颈癌?如何预防HPV感染?这些问题的答案你都知道吗?让我来告诉你吧。
一 标本采集
由专业医生对患者采集标本,采样前用棉拭子拭去宫颈口过多的分泌物,用宫颈刷置于宫颈口,轻轻搓动宫颈刷使其顺时针旋转3-4圈,为的是能采集到表皮和粘膜鳞状上皮,然后慢慢取出宫颈刷,将其放入装有细胞保存液的无菌细胞采集器中,在管口处将多余的刷柄折断,拧紧盖子,这样就能送到检验科进行检测了。采集标本需要注要以下几点:避开月经期、检查前三天避免性生活、避免阴道用药或灌洗等。这些注意事项要记住哦,不如会白跑一趟的!
二 实验室检测
1.先办身份证:检验科人员接到标本后会给每个标本编号,然后再录入电脑,保证一管一号,绝不出错。
2.带标本们坐旋转木马:从装有标本的无菌细胞采集器中吸取1mL标本到1.5mL灭菌离心管中,盖好盖子,放置离心机中12000r离心5分钟,然后去掉上层液体,底部沉淀物就是带有HPV的上皮细胞了。
3. 释放核酸吧:在底部沉淀物中加入50微升 HPV核酸释放剂,充分混匀放置10分钟后作为待测标本备用。HPV核酸释放剂的作用是快速裂解、释放标本中的HPV DNA。
4. 扩大家族:按照试剂说明书配制PCR反应液,每个反应管内分装40微升PCR反应液,然后分别取10μL待测标本放入反应管。注意,这里敲重点了:按编号顺序一个标本放一个反应管,千万不能乱放混放哦!将反应管按照顺序放入PCR扩增仪热循环模块内,盖上热循环模块外盖,按照试剂说明书设置反应程序,标本经过“变性-退火-延伸”的步骤循环进行40次反应,实现HPV DNA的快速扩增。
5. 病毒现身:PCR扩增仪通过荧光信号的变化实现HPV DNA的快速检测,根据反应后图像数据分析,使各项参数符合质量控制要求,根据CT值范围就能区分HPV阴阳性结果:CT值<=39的标本为阳性,CT值>39的标本为阴性。检验科审核结果无疑问后发放报告。如果结果可疑,需要查找并排除原因,并对标本进行重新检测,必要时还要重新采集标本进行再次检测。
至此,你的标本就完成了HPV实验室检测,懂了波!
三 临床意义
目前已经发现HPV含有200多种亚型,根据致癌潜力分为高危型和低危型两大类。目前我院最多可以进行23种亚型检测,其中HPV16型、18型、31型、33型、35型、39型、45型、51型、52型、53型、56型、58型、59型、66型和68型属于高危型。非生殖道感染低危型HPV常见“寻常疣”,学龄儿童的发病率高达50%。生殖道感染低危型HPV主要引起生殖道肛周皮肤和阴道下部的外生性湿疣类病变、扁平湿疣类病变和低度子宫颈上皮内瘤样变(CINI I),多呈一过性,可自然逆转。感染HPV不等于得了宫颈癌,一般人体感染HPV后可产生抗体,通过机体免疫反应,能自然被抑制或消失,大多可自行转阴,所以许多HPV感染妇女并无临床症状,临床上可见许多轻度宫颈鳞状上皮内瘤变自然消退。但是持续感染HPV高危型可能导致肛门癌、宫颈癌、癌前病变等。有研究表明定期联合检测HPV和液基薄层细胞检测(TCT)有利于宫颈癌早发现早治疗。
四 预防
生殖道HPV感染主要通过直接性接触传播,性生活开始的年龄越早,性伴侣越多,感染的风险就越大。HPV感染目前没有特效药可以清除病毒,治疗的主要目的是缓解症状、治疗疣体,病毒主要靠提高自身免疫力清除和接种疫苗进行预防,目前市面上有二价、四价和九价HPV疫苗可供选择,均适用于9-45岁女性。保持健康良好的生活习惯是预防HPV感染最廉价的方法。