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金黄色葡萄球菌的分离与培养全流程
2024-07-31 16:33:09
作者:黄琼
作者单位:岳阳县疾控预防控制中心

金黄色葡萄球菌分布广泛 ,革兰氏染色阳性,形态多为球状或椭圆状,常聚集排列状如葡萄串因其可以产生黄色脂溶性色素,所以典型菌落在血平板上菌落呈金黄色。

初识金黄色葡萄球菌

首先,简单了解一下金黄色葡萄球菌。它是一种圆形、表面光滑的细菌,通常呈现出金黄色,因此得名。这种细菌广泛存在于自然界中,包括空气、土壤、水以及许多食品表面,如肉类、乳制品和加工食品等。当食物被金黄色葡萄球菌污染并达到一定数量时,就可能引起食物中毒,症状包括恶心、呕吐、腹痛和腹泻等。

样品准备:从源头开始

要分离和培养金黄色葡萄球菌,首先需要获取可能含有该菌的样品。这些样品可能来自食品加工厂、超市货架上的商品,甚至是家里的冰箱。在实验室中,工作人员会穿戴好防护服,戴上手套和口罩,确保无菌操作。对于液体样品,如牛奶或果汁,工作人员会直接取25毫升样品,并加入到225毫升的7.5%氯化钠肉汤中,混合均匀,形成1:10的混悬液。而对于固体样品,如肉类或蔬菜,则需要先将其研磨成细碎的粉末,再按照同样的比例加入氯化钠肉汤中。接下来,将混合好的样品放入恒温培养箱中,在36℃±1℃的温度下培养24小时。这个过程中,样品中的细菌会大量繁殖,为后续的分离工作做好准备。

细菌分离

经过初步的培养,样品中的细菌数量已经大大增加。但此时,我们还没有找到金黄色葡萄球菌的“真身”。为了将它们从众多细菌中分离出来,我们需要使用特定的培养基。Baird-Parker平板和血平板是两种常用的培养基。它们含有不同的营养成分和指示剂,能够选择性地促进金黄色葡萄球菌的生长,并使其形成易于识别的菌落。将培养后的样品分别划线接种到这两种培养基上,然后再次放入恒温培养箱中培养。在血平板上,金黄色葡萄球菌会形成圆形、光滑凸起、金黄色的菌落,有时也可能呈现白色。菌落周围还可能出现完全透明的溶血圈,这是因为金黄色葡萄球菌能够分泌一种溶血素,破坏红细胞。而在Baird-Parker平板上,金黄色葡萄球菌的菌落则呈现出圆形、表面凸起、黑色的特征,边缘可能带有浅色。

确认身份

虽然我们已经通过培养基上的菌落特征初步识别了金黄色葡萄球菌,但为了确保万无一失,还需要进行进一步的确认。这时,革兰氏染色和血浆凝固酶试验就派上了用场。革兰氏染色是一种常用的细菌分类方法。通过将细菌涂片染色后观察其颜色变化,可以判断细菌是革兰氏阳性还是阴性。金黄色葡萄球菌是革兰氏阳性菌,因此在染色后会呈现出紫色的球状排列。而血浆凝固酶试验则是利用金黄色葡萄球菌能够产生凝固酶的特性来进行检测。取少量疑似金黄色葡萄球菌的培养物与新鲜配制的兔血浆混合,观察血浆是否凝固。如果血浆在半小时到6小时内凝固或凝固体积大于原体积的一半,就可以判定为阳性结果,从而确认该菌为金黄色葡萄球菌。

通过以上步骤,我们就可以从复杂的样品中成功分离并培养出金黄色葡萄球菌。这一过程不仅需要严谨的实验操作和条件控制,还需要科学家们的耐心和细心。

然而,金黄色葡萄球菌的防控工作并未因此结束。在日常生活中,我们仍然需要保持警惕,注意食品卫生和安全。比如,在购买食品时要选择正规渠道和可靠品牌;在储存和加工食品时要遵循正确的操作方法;在食用前要仔细检查食品的外观和气味等。

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