真菌在我们的日常生活及工作中无处不在且种类较多，目前越来越多的真菌成为条件致病菌，其可导致免疫力低下或者免疫功能不全的患者感染严重的甚至是致命的疾病。因此准确诊断是否感染，在选择合适的治疗方法时非常重要。实验室针对真菌感染的检测方法有很多，其中就有显微镜直接检测和真菌培养，前者可以快速查找出真菌，缺点是辨识有难度，准确率相对会下降；后者可以确认真菌的具体类型以便于临床选择敏感的抗真菌药物，但是耗时更长。那么有没有一个准确率高又耗时短的方法呢？下面本文将向大家介绍一项新技术，真菌免疫荧光染色，帮助大家全面了解这项准确、高效的检测诊断技术。

真菌感染常用的检测方法

1.真菌镜检。其优点在于简便、快速，无菌部位的阳性结果可直接确定真菌感染。但是由于阳性率较低，阴性结果亦不能排除诊断。

2.真菌培养。真菌培养是实验室检查中的重要环节，培养出致病真菌是进一步鉴定菌种的前提条件。常规的真菌培养需要在28～30℃温度下培养3～4周，一般培养选用沙氏培养基（SDA）或者马铃薯琼脂培养基（PDA）。

3.分子生物学鉴定。常用的分子生物学鉴定方法包括：真菌DNA碱基组成（G+C Mol％）、限制性片段长度多态性（RFLP）、随机扩增多态性DNA（RAPD）、Southern 印迹、脉冲场凝胶电泳（PFGE）、rDNA序列测定等。

4.生理学和生物化学方法。在纯培养上真菌生长比较快，可用生理、生化方法来鉴定菌种，多用于酵母菌鉴定。目前API系统，可用于丝状真菌的辅助鉴定。此外，微生物自动鉴定系统Vitek、autoSCAN-4、Biolog和MIS等自动鉴定系统，可较满意地鉴定临床上常见病原性酵母菌。

5.血清学方法检测真菌抗原成分。（1）β-D-1,3葡聚糖（BDG）：是许多真菌细胞壁的主要成分，如念珠菌、曲霉、镰刀菌等，但不包括隐球菌和接合菌；由于细菌、病毒、哺乳动物无这种成分，因而在循环血液中测得时则提示侵袭性真菌感染。（2）半乳甘露聚糖（GM）：GM是存在于曲霉和青霉细胞壁的一种热稳定的多糖，可用于侵袭性曲霉病的临床诊断。GM检测的敏感性为29％～100％，而其特异性可超过90％。

真菌感染新技术－荧光染色

1.什么是真菌荧光染色检测。免疫荧光技术是把血清学和显微镜示踪法相结合的一种技术。该技术具有免疫学反应的特异性及在黑色背景中发光物质易被发现的敏感性。原理：利用荧光增白剂与真菌细胞壁β-糖苷键结合，在紫外光的激发下，使真菌菌丝及孢子发出明亮的蓝绿色荧光，通过荧光显微镜观察并结合真菌的形态，判断真菌的存在。

2.荧光染色的优点。（1）简便快捷：免疫荧光染色法的操作简洁，检测时间短，适用于标本量大，快速检测。（2）灵敏度高：免疫荧光染色法的抗干扰强，检测原理是染色液与真菌细胞壁中几丁质等多糖成分反应，因此可排除检测中的其他干扰。其检测灵敏度很高，减少检查结果假阴性的发生。（3）识别度高：使用免疫荧光技术，染色后视野清，反应为荧光反应，因此其结果在显微镜视野中以清晰的荧光表现，更易于观察。（4）适用范围广：可与各类真菌结合发出荧光，使浅部真菌和深部真菌全部被检出。

3.荧光染色的适用科室及标本。（1）皮肤科：标本类型，毛发、皮屑、甲屑、脓液等。（2）妇产科：标本类型，阴道拭子、宫颈刮片、白带等。（3）耳鼻喉科：标本类型，耳道、鼻腔分泌物、咽部拭子。（4）眼科：标本类型，眼部分泌物等。（5）内科：标本类型，脑脊液、胸腹水、尿液、脓液、痰等。

小结

荧光染色检测技术是科学技术与医疗技术结合的产物。这一技术凭借其独特的优势，在阴道分泌物、尿液、痰液、胸水、肺泡灌洗液、皮屑、毛发等标本真菌鉴定和诊断方面展现出卓越的性能。荧光染色技术的开展，为临床准确快速诊断真菌感染性疾病提供了依据，也为合理用药、快速治疗创造了条件；为浅部真菌和深部真菌导致的各种真菌感染性疾病提供了快速准确的早期诊断，促进患者得到更为及时的治疗！