“姹紫嫣红染剂连连，左邻右舍人机尽染，时光飞转繁花露面，镜中红蓝尽显其言。”这段话浓缩的概括了HE染色。拿到一张病理报告单上面的图片，就是红蓝相间的，为什么会出现这种颜色？这种颜色是怎么出现的，有什么用？带着这些疑问我们来了解一下病理科常规制片 HE染色。

一、什么是HE染色？

HE染色，全称为苏木素-伊红染色法，是一种在生物医学领域广泛使用的染色技术。这种染色技术主要用于组织学、胚胎学和病理学的研究，通过特定的染色方法来揭示细胞和组织结构的细节。HE染色主要是观察细胞内部的形态结构，苏木素染液为碱性，主要使细胞核内的染色质内的核酸着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。

二、HE染色原理

细胞核内的染色质主要是脱氧核糖核酸，DNA的双螺旋结构中，两边链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所有细胞核被染成蓝色。细胞浆内主要成分是蛋白质，为两性化合物、细胞浆的染色与PH值有密切关系，当PH调到蛋白质等电点4.7-5.0时，胞浆对外不显电性，此时酸或碱性染料不易染色。当PH调到6.7-6.8时，大于蛋白质的等电点PH值，表现酸性电离，而带负电荷的阴离子，可被带正电荷的染料染色，此时胞核也被染色，核和胞浆难以区分，因此必须把PH调至胞浆等点电以下，在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷，就可被带负电荷的染料染色。伊红是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷结合而使细胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等感染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。

三、HE染色的标准化流程包括以下步骤

1.烘片

将切片放置染色架上，65℃烤箱中15分钟，以确保切片与载玻片充分附着并保持切片完整性。

2.二甲苯脱蜡

依次将切片放入二甲苯1，15分钟，在放入二甲苯2、15分钟，以脱去石蜡。

3.梯度酒精水化

100%酒精1，5分钟→100%精酒2，5分钟→95%酒精5分钟→85%酒精5分钟，水洗2分钟，

4.苏木素浸染

切片浸入苏木素染液3-8分钟，水洗两次，苏木素染色时间又苏木素的PH和温室决定。

5.盐酸酒精分化

切片在1%盐酸酒精分化液中分化3s,自来水冲洗，这样可以去除过深的核着色及胞浆上多余的苏木素颜色，使切片对比更加鲜明。

6.返蓝

我们一般用流水冲洗10分钟，也可以用氨水返蓝，这样可以去除切片上残留的盐酸，以保证切片长期保存不褪色。

7.伊红染色

浸染伊红1-3s,细胞质和间质呈粉红色。

8.脱水透明，封片

将切片依次放入95%酒精（5分钟，2次），无水酒精（5分钟，2次），二甲苯（5分钟，2次），这个过程因水被二甲苯取代，其折射指数接近于组织蛋白的折射指数，组织块变透亮，最后用中性树脂封片。

四、HE染色的注意事项

1.切片染色前，需彻底脱蜡，如脱蜡不干净，会导致切片着色不均，出现点状或片状不着色，核浆对比不清晰。

2.切片染苏木素后，应在显微镜下控制进行分色，一般以细胞核染色清楚而细胞质基本无色为佳。

3.切片在染色过程中应保持湿润，避免干燥，以免切片收缩、变形、影响观察。

4.染色液的新旧、切片的数目以及切片的保存时间等因素都可能影响染色效果，要根据实际情况进行调整。

正常着色情况下，HE染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞质及细胞外基质中的成分被伊红染成红色或粉红色，这使得在光学显微镜下可以清晰地观察到各种组织或细胞内的成分。组织内不同细胞的形态、大小、核的形状及染色深浅都可以作为鉴别细胞的依据。

HE染色作为组织学的“金标准”，凭借成本低、操作简便和结果直观等优势，仍是病理诊断的核心工具。新技术（如AI分析、多模态成像）的融合进一步拓展了其应用场景，推动精准医学发展。然而，传统HE染色在分子水平分析的局限性仍需要通过补充（如基因检测）来完善。