血培养——血流感染检测金标准对于诊断的重要性:阳性血培养分离得到的病原菌能明确诊断,药敏测试实验结果,指导或调整用药方案。
对于预后的重要性:血培养检测出有临床意义的致病菌通常提示患者的原发感染灶已经扩散,或者提示对原发感染灶进行相应处理,例如清创,引流等过程失败。病原菌的种类和检出时间通常能提供非常重要的预后信息。
血培养的关键要点:采血指征、采血时间、采血次数、接种血量、消毒灭菌、CRBSI。怀疑血流感染时应常规行血培养。怀疑患者有血流感染的症状有:不明原因的发烧(>38℃)或体温过低(<36℃),白细胞增多(>10,000/ul),粒细胞减少(<1,000/ul),休克、寒战、僵直,严重的局部感染(脑膜炎,心内膜炎,肺炎,肾盂肾炎,腹部术后感染等),心率异常加快,低血压或高血压,呼吸频率加快。
血流感染的采集时机:尽可能在寒战或开始发热时采血;在接受抗生素治疗前采血,如已经应用抗菌药物进行治疗,应在下一次用药之前采血培养。
采血时间:寒战或发热初起时采集可提高血培养的阳性率,寒战开始后2h内采集标本,血培养阳性率显著提高。血培养至少送2套。成人应采集2~3套:成人“一套”血培养应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一瓶,一次穿刺采血,算“一套”。采集第二套应从另一个穿刺点。儿童一般只做需氧培养,特殊患者才考虑厌氧培养。
常用血培养瓶:树脂需氧培养瓶、含溶血素厌氧菌培养瓶、儿童专用培养瓶、含溶血素分枝杆菌/真菌培养瓶。
所有需培养瓶采集标本前:于室温保存,切勿冷冻。如冷藏需恢复至室温使用。采集标本后:尽快送微生物室,如无法及时送检,应置于室温,不能置于冰箱或温箱,以免影响检出。
含溶血素厌氧菌培养瓶:用于厌氧菌以及厌氧型L型细菌等特殊细菌的快速检测;特殊的溶血素配方,可提高被白细胞吞噬细菌的检出,破坏红细胞和血小板,释放营养。培养基特殊的专利配方,可提高L型细菌/厌氧菌的阳性检出率并缩短检出时间。结合BD BACTEC系统的特殊数据处理模式,能够明显提高早期检出的效率。
儿童专用培养瓶:领取时注意:粉红色标签。专门为儿童设计,采血量仅为1~3ml;添加特殊促进细菌生长因子,采用树脂专利技术;低SPS浓度可提高儿童特征性病原菌(如耐瑟氏菌)的检出率。
含溶血素分枝杆菌/真菌培养瓶:专业设计应用于血液标本中分枝杆菌、酵母菌、真菌的快速检测。加入溶血素,可破坏红、白细胞、血小板,释放营养、释放被吞噬的菌株,并同时避免细胞呼吸造成的假阳性。
整个操作只需2个步骤:采血和检测。简化了血液标本分枝杆菌培养的前处理步骤,节省成本、节约时间,并同时降低了工作人员因处理标本所面临的潜在危险。培养瓶内增加了促进酵母菌、真菌生长的营养成分,可同时检测两类菌株。分枝杆菌培养速度较固体培养基提高了12天,检出率提高了23%。
厌氧血培养的意义:提高厌氧菌感染患者的诊断率;提高临床常见兼性厌氧菌的检出率;早期报告时间;保证了足够的采血量。
为什么要送厌氧血培养?7072份血培养,640份阳性,阳性率为9%。研究表明:用需氧瓶加厌氧瓶的组合检测出的葡萄球菌,肠杆菌科菌中某些菌和苛氧菌比一对需氧瓶多。厌氧瓶、需氧瓶互相补充:提高检出率。
对儿童厌氧血培养:不同于成人血培养,由于厌氧菌感染极少发生在儿童患者,因此一般建议只需采用需氧瓶。若采用厌氧瓶可以增加兼性厌氧菌的检出率。
对特殊的高危群体需考虑厌氧培养,包括:分娩过程中延迟破膜的新生儿、母婴垂直传播的绒膜炎、慢性口腔或鼻窦感染、蜂窝组织炎(特别是肛周及骶骨)、腹部感染体征、咬伤、破伤风、脓毒性静脉炎、接受类固醇治疗的儿童。
标本需间隔多久?一过性或间歇性菌血症:同时或短时间内采集2~3套血培养,因为体内巨噬细胞吞噬系统会在15~30min内清除掉进入人体内的细菌。不建议在2~5天内重复采集。
可疑急性心内膜炎患者要立即取血做血培养,30分钟内完成3套血培养的采集,采集后立即进行抗菌药的经验治疗。如果24小时内报告阴性,则继续采集2套血培养。
可疑的亚急性心内膜炎患者每间隔30分钟至1h采集1套,连续采集3套标本。如果24小时内报告阴性,则继续采集2套血培养。
应该采集多少血液?注意采血量及注入血培养瓶的顺序。采血量是影响灵敏度最关键因素:成人一份标本2个培养瓶(需氧+厌氧),每瓶8~10ml,共20ml;要求至
少采两份标本,即40ml。儿童尽量采集2套,一般只需采集需氧瓶,在保证采集血量<1%总血量下,一般为1~3ml。
采血量不足时应优先保证需氧瓶,因临床90%以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染。若采血量充足,注射器采集的血液先注入厌氧瓶,后注入需氧瓶,蝶形针采集的血液反之。若采血量不足,优先注入需氧瓶。
血培养应孵育多久?CLSI推荐全自动系统只需孵育5天。
90%阳性标本可在12小时内被检测,36小时内可检测出99%的阳性标本。与孵育7天相比,只有0.3%有临床意义的阳性血培养在5天内不能被检出。设定5天为孵育周期是最具有性价比的。
血培养的标准采集流程是什么?
血培养污染:如果消毒不严格,皮肤表面的细菌可能带入培养瓶中,导致血培养假阳性。临床医师判断血培养结果是感染还是污染非常困难,污染导致的血培养误判可带来额外的抗生素处方、住院天数的延长和医疗费用的增加。
总结:怀疑血流感染,应做血培养;至少应采集2套血培养,每套包括需氧及厌氧培养;每次应抽取足量的血液;绝大多数的细菌在5天内可被检出;“双抽四瓶”有助于实验室达成“血培养的最佳实践”。